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默克密理博Millipore超濾離心管

默克密理博Millipore超濾離心管

產品時間:2024-08-29

簡要描述:

默克密理博Millipore超濾離心管 UFC900396
新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量*過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。

默克密理博Millipore超濾離心管 UFC900396

 

使用注意事項
(1)選擇合適的超濾管。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
(2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量*過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
(3)平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。不同離心機的轉速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調至zui低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法*時間處理。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
(4)當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉淀,導致堵管。若發生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發生沉淀為止。
(5)前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續三次,zui后一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。

 應用
●●濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本
的生物樣本
●●凈化組織培養基提取液和細胞溶解液中的大分子成分,從反應混合液中去除引物、連接或
分子標記,在HPLC之前去除蛋白質
●●除鹽、更換緩沖液或滲濾

所提供的材料
Amicon? Ultra-4裝置包括一個蓋子、一個過濾器和一個離心管。

所需設備
●●帶有擺桶式或定角式轉子的離心器以及可以容納17 mm × 124 mm 15 mL錐底試管的
樣本腔/試管座
注意: 為了避免在離心過程中損壞裝置,在旋轉前請檢查間隙。
●●帶有200微升(μL)*的移液管,用于濃縮液回收

適用性
為確保對預定用途的適用性,建議進行初步的回收和截留試驗。 請參見“如何量化回收”
部分。

默克密理博Millipore超濾離心管 UFC900396

裝置儲存與保質期
儲存在15–30 °C下。保質期自生產之日起3年。密理博3KD超濾管UFC900396
1、Amicon Ultra系列離心超濾管,可用于生物樣品純化、蛋白質濃縮、脫鹽和緩沖液更換,垂直結構的膜減少了濃差極化,快速離心并可直接吸取回收樣本,濃縮倍數高達80-100 倍,是樣本處理的得力助手。
超濾管分為0.5ml、4ml、15ml三種上樣體積,并有3kd、10kd、30kd、50kd、100kd五種截留分子量。
2、產品訂購信息:
Amicon Ultra-0.5系列(貨號:UFC500396、UFC501096、UFC503096、UFC505096、UFC510096)
Amicon Ultra-4系列(貨號:UFC800396、UFC801096、UFC803096、UFC805096、UFC810096)
Amicon Ultra-15系列(貨號:UFC900396、UFC901096、UFC903096、UFC905096、UFC910096)

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